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    521 單鏈尿型纖溶酶原激活劑

    產品時間:2022-03-04

    簡要描述:

    NIBSC 95/564 單鏈尿型纖溶酶原激活劑(標準品)每個安瓿含有精確測量的 1ml SCuPA(非 Glyc.)溶液冷凍干燥后的殘留物,該溶液由 50 微克 SCuPA 在 0.01M 磷酸鹽緩沖液 pH7.4 中組成,每毫升含有 5mgs 豬膠原蛋白組分作為穩定劑(加夫尼等人 1996 年)。


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    非 WHO 參考材料推薦

    單鏈尿型纖溶酶原激活劑 (SCuPA),

    (非糖。)

    NIBSC 95/564

    酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
    二.甲酰胺解聚法:破碎細胞同上,然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質與DNA的結合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
    三.玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細胞,將裂解物鋪于乙醇上,然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪,DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
    四.異丙醇沉淀法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態)
    五.表面活性劑快速制備法:用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
    六.加熱法快速制備:加熱96℃-100℃,五分鐘,然后離心后取上清,可用于PCR反應。
    七.堿變性快速制備:先用NaOH作用20分鐘,再加HCI中和,離心后取上清,含少量DNA。

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